Принцип метода : мочевина под действием фермента уреазы разлагается на СО 2 и NН 3 , последний в реакции с салицилатом натрия и гипохлоридом натрия в присутствии нитропруссида натрия образует окрашенный продукт, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации мочевины в пробе.

Реактивы и оборудование: 1) реагент 1 – раствор уреазы в фосфатном буфере; раствор салицилата натрия и нитропруссида натрия; 2) реагент 2 – раствор гипохлорита натрия и гидроокиси натрия; 3) образцы сыворотки крови; 4) калибровочный раствор мочевины с концентрацией 5,0 ммоль/л; 5) пробирки, пипетки; 6) термостат; 7) ФЭК.

Ход работы:

Пробы перемешать и инкубировать 5 мин при температуре 37 0 С, затем добавить:

Реагент 2

После добавления реагента 2 пробы перемешать и инкубировать 5 мин при температуре 37 0 С.

Измерить оптическую плотность опытной (Д) и калибровочной (Д к) проб против контрольной пробы при λ = 610 нм. Окраска стабильна в течение 2 час.

Результаты: Д 1 =

Для расчета концентрации мочевины использовать формулу:

С=Д 1 /Д к х 5,0 (ммоль/л)

С 2 = Норма: 2,5 – 8,3 ммоль/л

Выводы:

Количественное определение мочевины в моче цветной реакцией с парадиметиламинобензальдегидом

Принцип метода : мочевина, взаимодействуя с парадиметиламинобензальдегидом в кислой среде, образует окрашенное в желто-зеленый цвет соединение. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации мочевины в пробе. Оптическую плотность раствора определяют методом фотоэлектроколориметрии.

Реактивы и оборудование : 1) 2%-водный раствор парадиметиламино-бензальдегида (пДАБ), 2) образцы мочи, 3) пробирки, 4) пипетки, 5) ФЭК.

Ход работы : к 0,5 мл мочи (предварительно разведенной в 100 раз) добавить 2,5 мл 2% водного раствора пДАБ и тщательно перемешать. Через 15 мин определить оптическую плотность раствора на ФЭК, используя синий светофильтр (=400 нм) и кюветы с рабочим расстоянием 10 мм. В качестве раствора сравнения использовать контроль, содержащий 0,5 мл воды и 2,5 мл 2% водного раствора пДАБ. Определить содержание мочевины в пробе (мг/мл) с использованием калибровочного графика. Рассчитать содержание мочевины в моче в

ммоль/сутки.

Результаты: D 1 = С 1 = мг/мл

D 2 = С 2 = мг/мл

Формула: С. В. 1,5 . 16,6 = (ммоль/сут)

где С – концентрация мочевины мг/мл

(по калибровочному графику)

В – разведение мочи (100 раз)

1,5 - среднесуточный диурез (л)

16,6 – коэффициент пересчета в единицах СИ

Принцип. Мочевина в кислой среде образует с диацетилмонооксимом в присутствии тиосемикарбози- да и солей железа окрашенное соединение, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию мочевины в сыворотке крови или моче.
Реактивы: трихлоруксусная кислота, 100 г/л;
диацетилмонооксим, 25 г/л воды. Реактив стабилен при хранении в темной посуде;
0,25%-ный раствор тиосемикарбозида (или 0,32%-ный раствор тиосемикарбозида гидрохлорида). Реактивы устойчивы при хранении в посуде из темного стекла;
серная кислота концентрированная;
85%-ная ортофосфорная кислота;
железа хлорат;
основной раствор железа хлората. 5 г хлорного железа растворяют и доводят дистиллированной водой до 100 мл, затем прибавляют 1 мл концентрированной серной кислоты;
рабочий раствор железа хлората. 1 мл основного раствора железа хлората доводят до 100 мл дистиллированной водой, добавляют 8 мл концентрированной серной кислоты и 1 мл 85%-ной орто- фосфорной кислоты. Хранят в темной посуде. Реактив годен в течение 2 нед;
цветной реактив. К 30 мл рабочего раствора железа хлората добавляют 20 мл дистиллированной воды, 1 мл 2,5%-ного раствора диацетилмонооксима и 0,25 мл 0,25%-ного раствора тиосемикарбозида. Цветной реактив готовят каждый раз перед употреблением;
калибровочный раствор мочевины - 25 мг%. 250 мг мочевины (х. ч.), высушенной в сушильном шкафу при 105 °С до постоянной массы, растворяют в мерной колбе на 1 л дистиллированной водой. В качестве растворителя можно использовать 0,2%-ный раствор бензойной кислоты (0,2 г кристаллической бензойной кислоты растворяют в 100 мл дистиллированной воды при интенсивном помешивании и нагревают на водяной бане). Стандарт, приготовленный на растворе бензойной кислоты, более стабилен, чем водный. Оба раствора при работе должны давать небольшие колебания экстинкции на ФЭКе. В ином случае требуется приготовить новый стандартный раствор.
Оборудование: фотоэлектроколориметр; водяная баня; центрифуга; центрифужные пробирки; алюминиевая фольга.
Ход определения. В центрифужную пробирку вносят

1. 8 мл дистиллированной воды, 0,2 мл сыворотки крови и 1 мл 10%-ного раствора трихлоруксусной кислоты. Перемешивают и оставляют на 10-20 мин, центрифугируют 15-20 мин при 3000 мин-1. В чистую пробирку вносят 0,5 мл прозрачной надосадочной жидкости (не взмучивая осадок) и 5 мл цветного реактива. Пробирку закрывают резиновой пробкой, обернутой алюминиевой фольгой, выдерживают в кипящей водяной бане 20 мин (точно) и затем охлаждают в течение 2-3 мин под струей водопроводной воды. Измерение проводят на ФЭКе при длине волны 530-560 нм (зеленый светофильтр) против холостой пробы в кювете с толщиной слоя 1 см не позднее чем через 15 мин после охлаждения.

Холостую пробу ставят так же, как опытную, но вместо надосадочной жидкости берут 0,5 мл дистиллированной воды. Одновременно определяют содержание мочевины в стандартной пробе. Стандартную пробу обрабатывают аналогично опытной, но вместо сыворотки берут 0,2 мл стандартного раствора мочевины.
Расчет проводят по формуле
где х - концентрация мочевины в сыворотке крови, мг%; Еоп - экстинкция опытной пробы; Е„ - экстинкция стандартной пробы; 25 - концентрация мочевины в калибровочном растворе, мг%.
Для перевода мг% в ммоль/л полученную величину умножают на коэффициент 0,1665. Ошибка метода составляет ±4 %.
Источник’. 43.
Клиническое значение. Мочевина - основной конечный продукт азотистого обмена. Синтезируется главным образом в печени, а у жвачных животных, кроме того, в стенке рубца из азота аммиака, аминокислот и амидов. Непосредственный предшественник мочевины в печени - гуанидиновая группировка аминокислоты аргинина. На долю мочевины приходится не менее половины остаточного азота крови и 80-83 % мочи.
Мочевина главным образом выделяется почками, у жвачных животных часть ее поступает в преджелудки со слюной, где распадается до аммиака и углекислого газа с последующим использованием продуктов распада рубцовой микрофлорой. Концентрация мочевины в крови у здоровых животных колеблется от 20 до 40 мг% (3,33-6,66 ммоль/л).
Значительное повышение содержания мочевины в крови (уремия) наблюдается при циркуляторной недостаточности почек, при которой нарушается фильтрация в клубочках. Такая патология возникает при сердечной недостаточности и дегидратации. Наиболее частые причины уремии - заболевания, при которых поражаются преимущественно почечные клубочки (хронический нефрит), или задержка выделения мочи при мочекаменной болезни, аденоме предстаты и др. Уремией сопровождается почечная недостаточность.
Повышение содержания мочевины в крови наблюдали при алкалозе рубца, скармливании животным большого количества гороха, зеленых бобовых кормов (вико-овсяная смесь, горохо-овсяная смесь). Резкую уремию (до 200 мг%) наблюдают у тяжело больных диспепсией телят (И. П. Кондрахин).
Продукционная гиперазотемия возникает при механических повреждениях тканей, обширных ожогах, лихорадочных состояниях, когда идет усиленный распад тканевых белков.
Тяжесть уремии связана не с концентрацией самой мочевины (она малотоксична), а с накоплением токсических производных гуанидина - гуанидинянтарной кислоты, метилгуанидина, гауни- динуксусной и гуанидинпропионовой кислот, которые образуются в организме вследствие нарушения нормального синтеза мочевины из арганина.
Уменьшение содержания мочевины в крови бывает при длительном белковом недокорме, при нарушении мочевинообразовательной функции печени, наблюдаемой при кетозе коров.

Еще по теме Определение мочевины в сыворотке крови по цветной реакции с диацетилмонооксимом. :

1. Определение железа в сыворотке крови по цветной реакции с сульфонированным (3-фенантролином.
2. Определение магния в сыворотке (плазме) крови по цветной реакции с титановым желтым (по Кункелю, Пирсону, Швейгерту в модификации И. В. Петрухина).
3. Определение сиаловых кислот в сыворотке крови по реакции с резорцином.
4. Определение мочевой кислоты в сыворотке крови по реакции с фосфорно-вольфрамовым реактивом.
5. Определение активности сорбитолдещдрогеназы (СДГ) в сыворотке крови по реакции с резорцином (метод Севела-Товарека).

Мочевина или карбамид, или диамид угольной кислоты – это то, что в конечном итоге остается от белков после их распада.

Мочевину многие люди путают с мочевой кислотой (результат пуринового обмена) и, следует отметить, у них есть нечто родственное, например, они обе принадлежат к группе компонентов остаточного азота, но в клинической лабораторной диагностике эти показатели несут разные понятия и не могут рассматриваться как одно целое.

Мочевина и ее норма

Уровень мочевины в крови может колебаться в сторону снижения или повышения в силу вполне физиологических обстоятельств. Например, на нее влияет питание, физическая нагрузка, а у женщин уровень мочевины в крови несколько ниже, чем у мужчин. Если в рационе имеет место нехватка белка, мочевина будет понижена, а коль перебор, значит, повысится.

Диета, обедненная хлором, например, отказ от поваренной соли мочевину повысит – это приспособительный механизм, включаемый организмом (ведь поддерживать коллоидно-осмотическое давление как-то нужно?).

Беременность не подчиняется общепринятым законам, там речь идет не об одной конкретной жизни, поэтому многие биохимические показатели, подстраиваясь под данный ответственный период, ведут себя по-разному, мочевина, например, снижается, но это в норме. Женщины с отягощенным анамнезом (пиелонефрит, гломерулонефрит, почечнокаменная болезнь, ) находятся под особым контролем, поскольку существует риск развития почечной недостаточности и уремического синдрома.

Норма мочевины в крови взрослого здорового человека находится в пределах 2,5 – 8,3 ммоль/литр. У женщин этот показатель обычно ниже, однако они не имеют отдельной нормы. Выведение карбамида с мочой составляет 20,0 – 35,0 г/сутки (333,6 – 587,7 ммоль/сут).

«Моча в крови»

Сильно повышенная концентрация мочевины в крови, возникающая как следствие острой и хронической почечной недостаточности хорошо известна специалистам разных профилей и называется уремическим синдромом («мочекровие»). Кроме карбамида, при уремии идет накопление , аммиака, мочевой кислоты и многих других продуктов белкового распада, которые отравляют организм и могут быстро привести к летальному исходу.

Уремия, вызванная накоплением в организме азотистых шлаков, сопровождается симптомами выраженной интоксикации, хотя всё начинается с обычных проявлений усталости:

• Разбитость;
• Общая слабость;
• Быстрая утомляемость;
• Головная боль.

К таким, на первый взгляд, безобидным симптомам, вскоре присоединяются:

1. Нарушение гомеостаза с расстройством деятельности многих органов, которые можно заподозрить при появлении тошноты, рвоты, поноса;
2. Отсутствие мочи (анурия) ;
3. Резко выраженные нарушения функции печени;
4. Расстройство зрения;
5. Склонность к кровоточивости;
6. Изменение кожных покровов (уремическая «пудра»).

Не ушедшие с мочой азотистые компоненты ищут себе выход. Они просачиваются сквозь кожу (уремический («иней»), серозные и слизистые оболочки, вызывая их повреждение. Особые страдания выпадают органам пищеварения, урогенитальному тракту, глазам, но больше всего видны кожные покровы, поэтому в народе говорят: «моча пошла через кожу». Лечить подобные состояния сложно, но в случаях острой почечной недостаточности, не глядя на очень бурное развитие событий, при своевременном и адекватном лечении (гемодиализ) возможно полное восстановление организма.

При хронической форме уремического синдрома, помимо всех изменений в почках, довольно быстро присоединяется с очень высокими цифрами артериального давления, нарушается кровообращение во всех органах, развивается . Жизнь человеку можно продлить, в основном, за счет гемодиализа (даже до 20 лет), но, в конце-концов, наступает терминальная стадия болезни (пневмония, сепсис, уремическая кома, ), которая, как правило, шансов не оставляет.

Спасти больного реально (разумеется, до терминальной стадии уремического синдрома! ) сможет донорская почка, которая, как известно, на дороге не валяется, поэтому пациенты годами находятся в листах ожидания. Родственники, к сожалению, не всегда подходят, к тому же, они сами нередко имеют подобную патологию (все-таки они – родственники).

Отдельные способности мочевины

Сама мочевина, в отличие от некоторых других шлаков (аммиак, цианат, ацетон, фенолы) не обладает токсичностью, зато имеет свои способности. Она может с легкостью проникать через плазматические клеточные мембраны в паренхиматозные органы (печень, почки, селезенка) и, обладая осмотической активностью, тянет за собой воду, что приводит к раздуванию клеток (гипегидратация), которые теряют возможность нормально функционировать.

Ввиду того, что мочевина хорошо проникает в клетки, она с таким же успехом проходит мембраны почечного фильтра, поэтому замечательно выводится с мочой. В клубочковом фильтрате карбамида находится столько же, сколько и в плазме, но передвигаясь по канальцам, она может отдавать воду и всасываться сама (канальцевая реабсорбция). При этом, чем выше скорость протекания мочи, тем меньше изменится содержание мочевины (она просто не успевает вернуться). Понятно, что в случае нарушении функции почек (почечная недостаточность) большое количество мочевины из воды вернется назад в организм и прибавится к имеющемуся в плазме – вот и повышенный уровень мочевины в крови. Из этого может следовать, что пониженной мочевина в крови бывает, если рацион человека содержит мало белковых продуктов, а моча в почке двигается с большой скоростью и мочевина не успевает вернуться.

Не только почки виноваты

Повышенная концентрация мочевины в крови, как было отмечено ранее, наблюдается при чрезмерном употреблении продуктов, богатых белков или обеднение диеты хлором. Кроме этого, повышение уровня карбамида могут вызвать патологические состояния, связанные то ли с усиленным образованием мочевины, то ли с задержкой азотистых шлаков по каким-либо причинам.

Усиленный распад белка, а, соответственно, повышение биосинтеза мочевины (продукционная азотемия) вызывают многие тяжелые заболевания человека:

• Гематологические болезни ( , лейкемия, злокачественная форма , гемолитическая желтуха).
• Тяжелые инфекции, в том числе, кишечные (дизентерия, брюшной тиф, холера).
• Заболевания кишечника (непроходимость, перитонит, тромбоз).
• Ожоговая болезнь.
• Новообразования предстательной железы.

Задержка азотистых шлаков (мочевины, в частности) и замедленная экскреция их с мочой в результате нарушения функциональных способностей выделительной системы (ретенционная почечная азотемия) или в результате иных причин (ретенционная внепочечная азотемия) нередко сопровождают различную почечную и другую патологию:

1. Пиело- и гломерулонефрит;
2. Поликистоз почек;
3. Нефрозы;
4. Острую и хроническую почечную недостаточность (ОПН и ХПН);
5. Отравление сулемой;
6. Опухоли мочевыводящих путей;
7. Мочекаменную болезнь (МКБ);
8. Рефлекторную анурию;
9. Декомпенсированная (нарушение почечной гемодинамики);
10. Желудочно-кишечные кровотечения;
11. Применение некоторых лекарственных средств (сульфаниламидных препаратов, антибиотиков, мочегонных).

Замедленное выведение мочевины с мочой наблюдается при нарушениях функции почек, нефрите, уремическом синдроме, (нефропатия беременных), использовании анаболиков, тяжелых поражениях печени (в этом случае она просто перестает вырабатываться печеночной паренхимой, поэтому ее содержание в крови не увеличивается).

В крови понижена, в моче повышена и другие варианты

Причины понижения мочевины в крови тоже слегка затрагивались выше (недостаток питания или полное голодание, состояние беременности). Однако в некоторых случаях мочевина понижена в силу весьма серьезных обстоятельств:

• Крайне тяжелые поражения печени (паренхиматозная желтуха, острая дистрофия, декомпенсированный цирроз), ведь в этом органе идет биосинтез мочевины.
• Отравления гепатотропными ядами (мышьяк, фосфор).
• Сниженное метаболическое разрушение белков.
• После процедуры гемодиализа и введения глюкозы.

Повышенный уровень мочевины в моче, то есть, ее усиленное выделение почками, может стать признаком заболевания или перенасыщения организма белком:

1. Злокачественная анемия (азотистый дисбаланс);
2. Применение отдельных медикаментозных средств (хинин, салицилаты);
3. Лихорадочные состояния;
4. Послеоперационный период;
5. Повышенная функция щитовидной железы;
6. Передозировка L-тироксина;
7. Введение 11-ОКС (11-оксикортикостероиды).

Что касается гиперпротеиновой диеты. Если человек усиленно потребляет богатые белком продукты, то вполне естественно, что здоровый организм будет усиленно выводить продукты катаболизма белка (уровень мочевины в моче повышен), пытаясь не допустить особенного изменения показателей в крови. Хотя если подобный рацион станет смыслом жизни, то мочевина в крови в конечном итоге станет повышаться.

Снизить мочевину в крови (в заключение)

Снизить мочевину в крови, если ее повышение вызвано не очень серьезными причинами, поможет диета. Может быть, не всегда следует насыщать свои завтраки, обеды и ужины белковыми продуктами? Наверное, лучше иной раз к столу добавить побольше овощей и фруктов, и они решат задачу.

Ну, а если мочевина в крови понижена, то, наряду с любимыми продуктами растительного происхождения, следует подумать и о белковой пище, чтобы дать организму нормально функционировать.

Определение концентрации мочевины в крови широко используется в диагностике, применяется для оценки тяжести патологического процесса, для наблюдения за течением заболевания и оценки эффективности проводимого лечения. Однако не следует забывать, что на уровень мочевины в крови могут влиять не только патологические, но и физиологические факторы (характер питания, физическая нагрузка и т. д.), а также прием лекарственных препаратов. Уровень мочевины может изменяться как в сторону повышения, так и снижения. При физиологических процессах степень отклонения уровня мочевины от нормы, как правило, незначительна, в то время как при патологии наблюдаются значительные сдвиги, причем степень изменения уровня мочевины зависит от тяжести патологического процесса.

Нормальные значения мочевины в крови

Концентрация мочевины в сыворотке крови здоровых взрослых людей составляет 2,5 - 8,3 ммоль/л (660 мг/л). У женщин, по сравнению со взрослыми мужчинами, концентрация мочевины в сыворотке крови обычно ниже. У пожилых людей (старше 60 лет) наблюдается некоторое увеличение концентрации мочевины в сыворотке крови (примерно на 1 ммоль/л по сравнению с нормой здоровых взрослых людей), что обусловлено снижением у пожилых способности почек концентрировать мочу.

У детей уровень мочевины ниже, чем у взрослых, однако у новорожденных в первые 2 - 3 дня содержание ее может достигать уровня взрослого (проявление физиологической азотемии, обусловленной повышенным катаболизмом на фоне недостаточного поступления жидкости в первые 2 - 3 сут жизни и низкого уровня клубочковой фильтрации). В условиях гипертермии, эксикоза цифры мочевины могут возрасти еще больше. Нормализация наступает к концу первой недели жизни. Уровень мочевины в крови у недоношенных 1 нед. - 1,1 - 8,9 ммоль/л (6,4 - 63,5 мг/100 мл), у новорожденных - 1,4 - 4,3 ммоль/л (8,6 - 25,7 мг/100 мл), у детей после периода новорожденности - 1,8 - 6,4 ммоль/л (10,7 - 38,5 мг/100 мл).

Повышение уровня мочевины в крови

Повышение уровня мочевины в крови наблюдается при:

• употреблении в пищу чрезмерного количества белка (в результате усиленного синтеза мочевины);
• диете, бедной ионами хлора (компенсаторная, приспособительная реакция, направленная на поддержание коллоидно-осмотического давления крови);
• обезвоживании организма: неукротимая рвота, профузный понос и т. д. (вследствие усиленной пассивной реабсорбции в почечных канальцах);
• приеме некоторых лекарственных препаратов: сульфаниламидов, левомицетина, тетрациклина, гентамицина, фуросемида, изобарина, допегита, невиграмона, лазикса, анаболических стероидов, кортикостероидов, тироксина в большом количестве;
• чрезмерном катаболизме белка: лейкозе, паренхиматозной желтухе, тяжелых инфекционных заболеваниях, непроходимости кишечника, ожоге, дизентерии, шоке;
• нарушении выведения мочевины, связанного с заболеваниями почек и мочевыводящих путей: хронические заболевания почек (гломерулонефрит, пиелонефрит); обструкции мочевыводящих путей (опухоли мочевыводящих путей, предстательной железы, почечно-каменная болезнь); острая и хроническая почечная недостаточность;
• нарушении выведения мочевины при заболеваниях и состояниях, не связанных с заболеваниями почек и мочевыводящих путей: недостаточность деятельности сердца, острый инфаркт миокарда; сахарный диабет с кетоацидозом, аддисонова болезнь и другие заболевания.

Повышение уровня мочевины в крови, связанное с ее усиленным образованием или снижением ее фильтрации в почках в результате нарушения гемодинамики, как правило, не достигает больших значений, содержание мочевины обычно не превышает 13 ммоль/л.

Большие значения уровня мочевины в крови наблюдаются при заболеваниях почек. Так, концентрация мочевины в плазме крови пациентов с хронической почечной недостаточностью может достигать 40,0 - 50,0 ммоль/л. Особенно высокое содержание мочевины (49,8 - 81,0 ммоль/л и выше) наблюдается при острой почечной недостаточности. При этом резко снижается выделение мочевины с мочой. Однако, следует заметить, что увеличение содержания мочевины не является ранним признаком нарушения функции почек. Установлено, что первоначально возрастает уровень мочевой кислоты, а затем мочевины и креатинина, что является угрожающим симптомом. При различных заболеваниях почек степень повышения содержания мочевины определяется характером повреждения нефрона, уровнем интоксикации, усиленным распадом белка в ткани (в связи с ограничением белка в пище почечных больных) и другими факторами. Повышение содержания мочевины в крови до 16,0 ммоль/л сочетается с нарушением функции почек средней тяжести, до 33,2 ммоль/л - тяжелым, свыше 49,8 ммоль/л - очень тяжелым нарушением с неблагоприятным прогнозом.

Увеличение содержания мочевины в крови, сопровождающееся синдромом интоксикации, называется уремией. Обычно считается, что мочевина не токсична и что сопровождающий увеличение ее содержания синдром интоксикации обусловлен накоплением в организме других продуктов. Вместе с тем следует иметь ввиду, что мочевина, относительно легко проходя через плазматические мембраны клеток, будучи осмотически активным веществом, увлекает в клетки паренхиматозных органов и воду. Это приводит к увеличению объема клеток (клеточной гипергидратации) и нарушению их функционального состояния.

Снижение уровня мочевины в крови

Уменьшение содержания мочевины в крови наблюдается редко:

• при беременности (вследствие физиологической гидремии);
• при диете с низким содержанием белка и высоким содержанием углеводов, голодании;
• при парентеральном введение жидкостей (вследствие гипергидратации);
• после гемодиализа;
• при пониженном катаболизме белков;
• при приеме СТГ;
• при нарушении всасывания в кишечнике, целиакии;
• при повышенной утилизации белка (в поздние сроки беременности, у детей до 1 года, при акромегалии);
• при врожденной недостаточности или отсутствии ферментов, участвующих в орнитиновом цикле мочевинообразования;
• при особенно тяжелых поражениях печени (печеночная недостаточность), вызванных, в частности, отравлением фосфором, мышьяком и другими гепатотропными ядами; остром некрозе печени, печеночной коме, декомпенсированном циррозе, гепатитах (известно, что печень обладает большими функциональными резервами, способность ее к дезаминированию и синтезу мочевины сохраняется при исключении из процессов обмена до 85% ее ткани).

Литература:

• Цыганенко А. Я., Жуков В. И., Мясоедов В. В., Завгородний И. В. - Клиническая биохимия - Москва, «Триада-Х», 2002 г.
• Слепышева В. В., Балябина М. Д., Козлов А. В. - Методы определения мочевины
• Клиническая оценка лабораторных тестов - под редакцией Н. У. Тица - Москва, «Медицина», 1986 г.
• Камышников В. С. - Карманный справочник врача по лабораторной диагностике - Москва, МЕДпресс-информ, 2007 г.
• Маршалл Дж. - Клиническая биохимия - Москва, Санкт-Петербург, «Бином», «Невский Диалект», 2000 г.

Распад белков в организме сопровождается выделением мочевины . При этом, концентрирующийся в мочевине азот, вместе с ней выводится из организма. Повышенное содержание мочевины в крови — признак почечной недостаточности, выливающийся, например в уремию. Вот почему, важное значение приобретает определение мочевины в сыворотке крови.

Специальные исследовательские мероприятия на сыворотке крови проводятся с целью установления возможной почечной патологии , а также степени её развития. Вовремя проведенный анализ — это возможность сокращения сроков лечения.

Анализ возможен в специализированных медицинских лабораториях, имеющих соответствующую лицензию на право проведения подобных работ, а также техническое оснащение и химические реактивы.

Исследования сыворотки крови на концентрацию мочевины может проводиться несколькими методами, разделенными на следующие возможные группы:

• Газометрические.
• Уреазные.
• Фотометрические прямые.

Для определённых методик определения мочевины в кровяной сыворотке могут использоваться готовые специальные наборы с необходимым составом лабораторных реактивов.

Показания для исследования

Нормативный показатель концентрации мочевины в крови у взрослого человека находится на уровне 640-660 мг на литр. У спортсменов, занимающихся тяжёлой атлетикой, бодибилдингом, показатель присутствия мочевины несколько выше. Это объясняется усиленным метаболизмом, связанным с употреблением больших объемов протеина. Однако, повышенное значение мочевины может быть обусловлено следующими возможными патологиями:

• Лейкоз.
• Дизентерия.
• Желтуха паренхиматозная.
• Пиелонефрит.
• Почечная недостаточность (хроническая форма).
• Гломерулонефрит.

Перечисленные недуги — распространенные показания, ввиду чего может понадобиться анализ концентрации мочевины в крови.

Принципы анализа

Вне зависимости от метода проведения анализа, определение мочевой кислоты имеет следующие важные особенности:

• Время забора крови с 8 до 11 часов дня.
• Пациент, не должен быть голодным более 14 часов.
• Кровь берётся из вены больного.
• Достаточный объём крови в пределах 8 мл.

Методы исследования

Чтобы определить точную концентрацию мочевой кислоты в сыворотке крови, больному могут быть предложены следующие возможные варианты :

• Ксантгидроловые.
• Гипохлоритные.
• Диацетилмонооксимные.
• Полуколичественные методы с использованием индикаторной бумаги.
• Методы с использованием ионоселективных электродов.
• Ферментативные.
• Газометрические.

Ксантгидроловые методы

Базовый компонент, задействуемый при исследованиях — ксантгидрол (гетероциклический спирт).

Принцип метода — получение соединения ксантгидрола с мочевиной и последующее определение весовой доли каждого вещества.

Гипохлоритные методы

Данные методы определения мочевой кислоты используются нечасто , ввиду высокой мутности соединения мочевины с лабораторными реагентами. В исследованиях задействуется гипохлорит натрия, фенол.

Диацетилмонооксимные исследования

Определение мочевой кислоты в крови происходит посредством реакции Фирона, когда в соединение входит диацетилмонооксим и мочевина.

В результате получается характерное окрашивание используемых элементов.

Полуколичественные методы с использованием индикаторной бумаги

Преимущество методов — оперативность получения данных.

В среднем на анализ затрачивается не более 10 минут.

Распространены тестовые бумаги с нанесенными реактивами под маркой «Уреатест», «Уранал».

Принцип проведения анализа практически схож, как если бы использовался глюкометр замера холестерина и сахара (данный портативный прибор с успехом устанавливает холестериновые превышения в организме человека).

Методы с использованием ионоселективных электродов

При использовании метода селективный и ещё один вспомогательный электроды помещаются в исследуемую среду. Сигнал от пары электродов, направляется на измерительный прибор.

Ферментативные исследования

Диагностика посредством ферментативных исследований подразумевает гидролиз определённого объёма мочевины посредством уреазы.

Нормальный показатель pH при этом в пределах 6,0-8,0.

Газометрические методы

Другое название исследований гипобромитный анализ концентрации мочевины. Идея методов — использование окислительной реакции и разложения мочевины посредством гипобромита. При реакции выделяется азот и углекислота. Последний компонент устраняется специальным раствором, после чего подсчитывается количество азота.